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| 試驗(yàn)部分 研究對(duì)象： 96只21日齡斷奶雄性ICR小鼠（20-22 g），在標(biāo)準(zhǔn)化的環(huán)境條件下（22±1℃，相對(duì)濕度為50％，12h的明暗循環(huán)中），將其放在單獨(dú)的不銹鋼籠中進(jìn)行7天的適應(yīng)期。 方法: 將96只28日齡的小鼠隨機(jī)分成4個(gè)研究組，研究期間飼喂相同的商業(yè)谷物飼料，每組分別飲用含有0%（對(duì)照組）、1%、2%、4% XOS-95P的去離子水（即每200mL去離子水中添加0g、2.1g、4.2g、8.4g XOS-95P制成的飲用水）。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間所有小鼠都可以自由進(jìn)食食物和實(shí)驗(yàn)飲用水，研究周期為30天，期間每天記錄實(shí)驗(yàn)性飲用水，且每隔10天隨機(jī)選擇每組8只小鼠記錄一次體重和食物攝入量；此外，在38、48和58日齡時(shí)，分別從每組中隨機(jī)選擇8只斷水?dāng)嗍?h的小鼠，采用二氧化碳將小鼠安樂死后，對(duì)小鼠進(jìn)行盲腸酸堿度、盲腸壁重、血清鈣和磷濃度的檢測(cè)、骨骼特性分析、腸道形態(tài)學(xué)評(píng)價(jià)和免疫組織化學(xué)分析。 如表1所示，所有小鼠的平均增重或最終平均體重在各組之間沒有明顯差異（P>0.05）。此外，沒有觀察到食物和水的攝入量或有效攝入量的顯著變化（p>0.05）。
如表2所示，觀察到各組小鼠盲腸pH具有顯著差異性（p=0.005）且呈劑量依賴性降低；盲腸壁重量呈現(xiàn)劑量依賴性增加，但與對(duì)照組相比，只在4% XOS組中觀察到顯著差異（p=0.01）。當(dāng)分析血清鈣和磷濃度時(shí)，所有組在第58天沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異（p> 0.05）。
如表3所示，在不同的生長(zhǎng)階段，各組間股骨中軸的長(zhǎng)度、重量或直徑?jīng)]有顯著差異（p>0.05）；盡管在所有XOS組中通過DEXA測(cè)定的整個(gè)股骨和股骨遠(yuǎn)端的骨密度顯示出在三個(gè)生長(zhǎng)階段的劑量依賴性增加，但是在生長(zhǎng)后期0% XOS和4% XOS之間在股骨遠(yuǎn)端的骨密度（BDM）中觀察到顯著差異（p=0.04）；同時(shí)，在生長(zhǎng)后期4% XOS組的骨斷裂強(qiáng)度顯著高于0% XOS組（p=0.008）；第4組在第58天的960/cm FWHM值顯著低于第1組（p=0.007），其他各組之間無(wú)顯著差異（p>0.05）。
如表4所示，隨著飲用XOS濃度的增加，十二指腸絨毛高度呈線性增加。然而，與0%、1%和2% XOS相比，只有4% XOS達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性（分別p<0.001、p=0.001和p=0.008）。同時(shí)，觀察到隱窩深度的劑量依賴性減少，僅在0% XOS組和4% XOS組之間觀察到顯著增加（p=0.006）。VH:CD的變化與腸絨毛高度和隱窩深度一致。與0% XOS和1% XOS相比，使用4% XOS顯著增加了VH:CD （分別p=0.001和p=0.004）。
進(jìn)行免疫組織化學(xué)分析和半定量分析，以評(píng)估TRPV6和NCX1在所有58天小鼠十二指腸中的蛋白表達(dá)。如圖1所示，所有組均觀察到NCX1陽(yáng)性染色。與不含XOS的對(duì)照組相比，1%、2%和4% XOS組均上調(diào)了NCX1的表達(dá)，但僅在對(duì)照組和4% XOS組之間觀察到顯著增加（p= 0.01）。同時(shí)，在1%，2%和4% XOS組小鼠中TRPV6的表達(dá)明顯高于對(duì)照組（分別為p= 0.02，p = 0.03和p = 0.04）。
圖1 低聚木糖（XOS）添加對(duì)四組十二指腸Na+/Ca2 +交換劑1 (NCX1) (a, b)和瞬時(shí)受體電位香草醛受體6 (TRPV6)(c, d)表達(dá)的影響。 比例尺：10 μm。數(shù)值為平均值（n=8），其標(biāo)準(zhǔn)誤差由豎線表示。 a, b不同字母的平均值差異顯著（p<0.05；圖基（tukey）事后檢驗(yàn)法）。 參考資料： |
