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實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 選擇120只雄性昆明種小鼠(18.0-22.0 g)作為研究對(duì)象,實(shí)驗(yàn)分為2個(gè)部分,分別是小腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)與排便實(shí)驗(yàn), 均分別設(shè)定3個(gè)劑量組、1個(gè)空白對(duì)照組、1個(gè)模型組, 每組 12只動(dòng)物。受試粉劑人體推薦攝入量為10 g/(人·d)(通便粉劑含低聚木糖、圓苞車前子殼、當(dāng)歸提取物等成分, 其中總膳食纖維含量≥26%, 低聚木糖含量≥6.5%,規(guī)格為10g/袋),去除輔料后樣品服用量為4.89 g/(人·d), 成人體重按60 kg計(jì)算,折合劑量相當(dāng)于每日81.5 mg/(kg·BW)。按相當(dāng)于人體推薦劑量的 5、10、20倍確定小鼠的低、中、高劑量, 即各組小鼠每日食用量分別為408、815和1630 mg/(kg·BW)。分別稱取2.040、4.075、8.150 g去輔料樣品, 各加純水至100 mL, 混勻, 配成濃度為20.40、40.75、81.50 mg/mL 的混懸液, 分別給予相應(yīng)劑量組動(dòng)物灌胃, 灌胃體積為0.2 mL/10(g·BW), 陰性對(duì)照組和模型對(duì)照組給予等體積的純水, 每天灌胃1次, 連續(xù)灌胃7 d。小腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn):末次給予受試樣品后, 各組小鼠禁食不禁水16 h, 模型對(duì)照組和3個(gè)劑量組灌胃給予復(fù)方地芬諾酯 5 mg/(kg·BW),空白對(duì)照組給予蒸餾水。給予復(fù)方地芬諾酯 0.5 h 后, 劑量組分別給予含相應(yīng)受試樣品的墨汁(含5%活性碳粉、10%阿拉伯樹膠), 陰性和模型對(duì)照組給予墨汁灌胃。25 min后立即脫頸椎處死動(dòng)物, 打開腹腔, 分離腸系膜, 剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管, 置于托盤上, 輕輕將小腸拉成直線, 測(cè)量腸管長(zhǎng)度為“小腸總長(zhǎng)度”, 從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度”。按公式下列計(jì)算墨汁推進(jìn)率(P), 并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。墨汁推進(jìn)率(%)=[墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度(cm)]/[小腸總長(zhǎng)度(cm)]×100%排便實(shí)驗(yàn):各組小鼠于末次給予受試樣品后, 禁食不禁水16 h, 模型對(duì)照組和3個(gè)劑量組灌胃給予復(fù)方地芬諾酯10 mg/(kg·BW),空白對(duì)照組給予等量的蒸餾水。給予復(fù)方地芬諾酯0.5 h后, 模型對(duì)照組和空白對(duì)照組小鼠給予墨汁灌胃, 3個(gè)劑量組給予含相應(yīng)受試樣品的墨汁, 同時(shí)開始計(jì)時(shí)。每只動(dòng)物均單獨(dú)飼養(yǎng), 正常飲水、進(jìn)食, 觀察記錄每只小鼠首次黑便時(shí)間、5 h內(nèi)排便粒數(shù)及重量。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (1)通便粉劑對(duì)小鼠體重的影響 如表1所示,通便粉劑對(duì)小腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)和排便實(shí)驗(yàn)的各組小鼠的體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),說明樣品對(duì)小鼠體重?zé)o明顯影響。(2)通便粉劑對(duì)小腸運(yùn)動(dòng)的影響 如表2所示,經(jīng)墨汁推進(jìn)率轉(zhuǎn)換值統(tǒng)計(jì)分析, 模型對(duì)照組小鼠的墨汁推進(jìn)率顯著低于空白對(duì)照組(P<0.01), 說明便秘模型成立;各劑量組小鼠的墨汁推進(jìn)率顯著高于模型對(duì)照組(P<0.05)。(3)通便粉劑對(duì)小鼠排便的影響 如表3所示,便秘模型對(duì)照組的小鼠首便時(shí)間顯著大于空白對(duì)照組(P<0.01),而糞便的粒數(shù)及糞便重量均顯著小于空白對(duì)照組(P<0.01),說明便秘模型成立。樣品各劑量組的首便時(shí)間均比便秘模型對(duì)照組的顯著縮短(P<0.01);各劑量組的糞便粒數(shù)均顯著大于便秘模型對(duì)照組(P<0.01);各劑量組的糞便重量均顯著大于便秘模型組(P<0.01)。以上結(jié)果表明, 通便粉劑能夠縮短便秘小鼠的首便時(shí)間, 并增加其所排糞便的粒數(shù)和重量。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論 以圓苞車前子殼、當(dāng)歸提取物、低聚木糖為主復(fù)配的粉劑可以使小鼠小腸墨汁推進(jìn)率顯著增加, 且首次排黑便時(shí)間明顯縮短、6 h內(nèi)排黑便粒數(shù)和重量顯著增加,表明該通便粉劑具有改善小鼠通便作用的功效,此研究為開發(fā)具有通便功能的產(chǎn)品提供了有效的科學(xué)依據(jù)。
參考資料: 李日許,黃暨生,郭秋平.圓苞車前子殼復(fù)配粉劑的通便功能研究[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2020,11(22):8593-8597. |
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