試驗設(shè)計 實驗樣品:自制益生菌沖劑,主要原料為復(fù)合乳酸菌粉(嗜酸乳桿菌+乳雙歧桿菌+低聚木糖,具體比例:嗜酸乳桿菌23%、乳雙歧桿菌2%,其余為稀釋劑)和低聚木糖,1.5g/袋的鋁箔袋裝,推薦食用方法為每天1次,每次1袋,溫開水沖飲。 實驗動物:選用SPF級昆明種雌性小白鼠48只,6~8周齡(體重為18~22 g)。 劑量與分組:實驗按人體每日推薦量(以兒童體重30 kg計,推薦量為0.05 g/kg·BW)的5倍(0.25 g/kg·BW)、10倍(0.5 g/kg·BW)和30倍(1.5 g/kg·BW)分成對照組和低、中、高劑量組。 灌胃方法及試驗測定指標(biāo):實驗時分別稱取樣品0.50、1.00、3.00 g,用純凈水配制成20 mL的樣液,分別供低、中、高三個劑量組動物灌胃使用,將小鼠在實驗室條件下適應(yīng)三天后,隨機(jī)將48只鼠分為四組,每組12只,每日灌胃給予受試物,給樣量根據(jù)每周體重增減調(diào)整,連續(xù)灌胃四周,對照組灌服無菌純凈水。在實驗結(jié)束前的第4天免疫動物進(jìn)行小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(足跖厚度增加法)、ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(MTT法)和NK細(xì)胞活性測定(LDH法)。
試驗結(jié)果 (1)益生菌沖劑對小鼠體重的影響 由表1和表2可知,各劑量組各期體重與對照組相應(yīng)時期體重比較,差異均無顯著性意義,表明益生菌沖劑對小鼠的體重生長無明顯影響。
(2)益生菌沖劑對小鼠脾臟重量和胸腺重量的影響 由表3可知,各劑量組臟器/體重比值與對照組比較,差異均無顯著性意義,表明益生菌沖劑對小鼠的脾臟重量和胸腺重量無明顯影響。
(3)益生菌沖劑對小鼠免疫力的影響 益生菌沖劑對小鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響:由表4可知,綿羊紅細(xì)胞誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(足跖增厚法),其高劑量組足跖增厚值與對照組比較,差異有顯著性意義。
益生菌沖劑對ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)的影響:由表5可知,對ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng),其高劑量組光密度差值高于對照組,差異有顯著性意義,益生菌沖劑的脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗結(jié)果為陽性,表明受試樣品具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能作用。
益生菌沖劑對受試動物NK細(xì)胞活性的影響:由表6可知,中、高劑量組的NK細(xì)胞活性高于對照組,差異均有顯著性意義,益生菌沖劑對受試動物NK細(xì)胞活性試驗結(jié)果為陽性,表明受試樣品具有增強(qiáng)NK細(xì)胞活性作用。
試驗結(jié)論 本文為研究復(fù)合乳酸菌粉((嗜酸乳桿菌+乳雙歧桿菌+低聚木糖)的益生菌沖劑在增強(qiáng)兒童免疫力方面的作用,采用了《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》(2003版)之“增強(qiáng)免疫力功能檢驗方法”,即對SPF級昆明種小鼠經(jīng)口每日分別給予該復(fù)合益生菌產(chǎn)品0.25、0.50、1.50 g/kg·BW,相當(dāng)于人推薦日服量的5、10、30倍共4周,結(jié)果表明綿羊紅細(xì)胞誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗和ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化增殖試驗結(jié)果呈陽性,說明該樣品具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能作用(P<0.05);同時受試動物NK細(xì)胞活性試驗結(jié)果呈陽性,說明該樣品具有顯著增強(qiáng)NK細(xì)胞活性作用(P<0.01),以上結(jié)果表明攝入該復(fù)合益生菌粉沖劑產(chǎn)品具有增強(qiáng)免疫力的功能作用。
參考資料: 朱韶娟,張立彥.復(fù)合乳酸菌粉沖劑增強(qiáng)免疫力作用的研究[J].現(xiàn)代食品科技,2013,29(01):77-80+145. |