試驗(yàn)設(shè)計(jì) 研究對(duì)象:以健康清潔級(jí)雄性昆明小鼠100只(體重18~21g)和健康清潔級(jí)BALB/c雄性小鼠50只(體重18~21g)為研究對(duì)象。 小腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn):50只昆明小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)5d后,按照體重將小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、低聚木糖0.16g/kg劑量組、低聚木糖0.6g/kg劑量組、低聚木糖1.0g/kg劑量組共5組,每組10只小鼠,飼養(yǎng)于室溫(25+2)℃,相對(duì)濕度55%+5%的動(dòng)物房,期間可自由獲取食物和飲水;灌胃14d后,各組小鼠禁食16h(期間自由飲水);模型對(duì)照組和不同劑量低聚木糖組灌胃給予0.25g/L復(fù)方地芬諾酯,正常對(duì)照組給予蒸餾水(灌胃量為20mL/kg), 30min后各受試物實(shí)驗(yàn)組小鼠灌胃含相應(yīng)劑量受試物的阿拉伯膠墨汁懸液,正常對(duì)照組和模型對(duì)照組灌胃給予空白阿拉伯膠墨汁(小鼠灌胃量為20mL/kg);25min后,脫頸椎處死動(dòng)物,打開(kāi)腹腔分離腸系膜,剪取上端自幽門(mén)、下端至回盲部的腸管,輕輕將小腸拉成直線,測(cè)量腸管長(zhǎng)度為“小腸總長(zhǎng)度”,從幽門(mén)至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度”,計(jì)算墨汁推進(jìn)率如下:推進(jìn)率(%)=墨水移動(dòng)距離(cm)/小腸全長(zhǎng)(cm)x100。 排便試驗(yàn):50只昆明小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)5d后,按照體重將小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、低聚木糖0.6g/kg劑量組、低聚木糖1.0g/kg劑量組、低聚木糖2.0g/kg劑量組共5組,每組10只小鼠,灌胃給予相應(yīng)的受試物;灌胃14d后,將各組小鼠禁食16h (期間自由飲水);模型對(duì)照組和各受試物實(shí)驗(yàn)組灌胃給予0.50g/L復(fù)方地芬諾酯,正常對(duì)照組給予蒸餾水(灌胃量為20mL/kg),30min后各受試物實(shí)驗(yàn)組小鼠灌胃給予含相應(yīng)劑量受試物的阿拉伯膠墨汁懸液,正常對(duì)照組和模型對(duì)照組灌胃給予空白阿拉伯膠墨汁懸液(小鼠灌胃量為20mL/kg);動(dòng)物均單籠飼養(yǎng),正常飲水進(jìn)食,從灌胃阿拉伯膠墨汁懸液起開(kāi)始計(jì)時(shí),記錄每只動(dòng)物排首粒黑便時(shí)間、5h內(nèi)自排出首粒黑便后的糞便粒數(shù)及重量。 調(diào)節(jié)腸道菌群功能實(shí)驗(yàn):50只BALB/c小鼠,按照體重將小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、低聚木糖0.6g/kg劑量組、低聚木糖1.0g/kg劑量組、低聚木糖2.0g/kg劑量組共4組,每組10只小鼠;給予受試物前及14d后,無(wú)菌采取小鼠糞便(約0.1g),進(jìn)行腸道雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌的檢測(cè)。 試驗(yàn)結(jié)果 (1)低聚木糖對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)功能的影響 由表1可知,模型對(duì)照組小鼠的墨汁推進(jìn)率顯著低于正常對(duì)照組的墨汁推進(jìn)率(p<0.01),即小鼠腸蠕動(dòng)抑制模型成立;與模型對(duì)照組相比,0.16g/kg、0.6g/kg、1.0g/kg低聚木糖劑量組的墨汁推進(jìn)率均未出現(xiàn)顯著性差異(p>0.05)。
(2)低聚木糖對(duì)小鼠小腸排便功能的影響 由圖1可知,模型對(duì)照組小鼠的首粒黑便時(shí)間較正常對(duì)照組顯著推遲(p<0.05),排便粒數(shù)及排便重量較正常對(duì)照組顯著降低(p<0.05),便秘模型成立。1.0g/kg和2.0g/kg低聚木糖組對(duì)便秘小鼠的首粒黑便時(shí)間、排便粒數(shù)和排便重量均有顯著影響(p<0.05);與模型對(duì)照組相比,1.0g/kg組小鼠的首粒黑便時(shí)間提早了21.3%,排便重量和粒數(shù)分別增加了133.3%和183.3%; 2.0g/kg組小鼠的首粒黑便時(shí)間提早了22.7%,排便重量和排便粒數(shù)分別增加了122.2%和125.0%;在本次實(shí)驗(yàn)中,0.6g/kg低聚木糖劑量組小鼠的首粒黑便時(shí)間、排便粒數(shù)、排便重量與模型組相比未發(fā)現(xiàn)顯著性的變化。
(3)低聚木糖對(duì)小鼠腸道菌群的影響 由表2可知,與實(shí)驗(yàn)前比較,正常對(duì)照組小鼠腸道內(nèi)的雙歧桿菌和乳桿菌數(shù)量對(duì)數(shù)值在實(shí)驗(yàn)前后未出現(xiàn)顯著變化(p>0.05);在攝入低聚木糖14d后,小鼠腸道內(nèi)的雙歧桿菌及乳桿菌數(shù)量對(duì)數(shù)值較實(shí)驗(yàn)前明顯增加(p<0.01);與正常對(duì)照組相比,攝入低聚木糖14d后小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌及乳桿菌數(shù)量對(duì)數(shù)值均顯著高于正常對(duì)照組(p<0.01),腸桿菌和腸球菌的數(shù)量對(duì)數(shù)值未見(jiàn)顯著性變化;實(shí)驗(yàn)前后各組小鼠腸道內(nèi)的腸桿菌數(shù)量對(duì)數(shù)值未有顯著變化(p>0.05) ,小鼠腸道內(nèi)腸球菌數(shù)量對(duì)數(shù)值較實(shí)驗(yàn)前增加,但其增加幅度遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于雙歧桿菌及乳桿菌增加幅度。 試驗(yàn)結(jié)論 低聚木糖劑量組的小鼠小腸推進(jìn)率均與模型對(duì)照組小鼠無(wú)顯著性差異;排便實(shí)驗(yàn)中低聚木糖1.0、2.0g/kg劑量組小鼠首粒黑便時(shí)間、5h排便粒數(shù)及5h排便質(zhì)量均與模型對(duì)照組具有顯著性差異;低聚木糖干預(yù)后,小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌及乳桿菌數(shù)量較干預(yù)前顯著增加,并與對(duì)照組形成顯著性差異;本研究驗(yàn)證了低聚木糖具有潤(rùn)腸通便和調(diào)節(jié)腸道菌群的功效。
參考資料: 王鑫,朱婧,劉靜,肖林,孫忠偉,陳小剛,李東.低聚木糖潤(rùn)腸通便及調(diào)節(jié)腸道菌群功能的研究[J].食品工業(yè)科技,2015,36(14):359-362. |