試驗部分 將試驗納入的慢性腹瀉患者按照隨機(jī)平行對照試驗的原則隨機(jī)分為3組，安慰劑組（CK組7人，每天3 g麥芽糊精）、低劑量組（3X組8人，每天3 g XOS）和高劑量組（6X組7人，每天 6 g XOS），干預(yù)4周。干預(yù)期間，3X組有1人中途退出、6X組有1人服用了抗生素而被剔除，最后CK組7人，3X組7人，6X組6人，共計20人完成干預(yù)，結(jié)束后記錄患者腹瀉癥狀評分，測定患者血清生化指標(biāo)、糞便中短鏈脂肪酸和腸道菌群的變化。隨后將三組干預(yù)后患者糞菌液分別灌胃三組小鼠（實驗流程見圖1），連續(xù)灌胃24天，測定其腸道通透性及炎癥因子水平。
試驗結(jié)果 （1）腹瀉癥狀評分 如圖2所示，根據(jù)患者干預(yù)前后的腹瀉癥狀評分，發(fā)現(xiàn)3X組和6X組在干預(yù)后的腹瀉癥狀評分均顯著下降（P<0.05），安慰劑CK組也有下降，但無顯著性差異。故初步判斷XOS的干預(yù)使得腹瀉癥狀有所減輕。
（2）臨床血清生化指標(biāo)變化 如圖3所示，經(jīng)過干預(yù)，CK組總膽固醇和甘油三酯變化范圍較小，XOS干預(yù)組的TC有升高趨勢（P>0.05），TG呈下降趨勢（P>0.05），三組變化均無顯著性差異，推測XOS有改善慢性腹瀉患者脂代謝的效果，但不顯著。
（3）患者糞便短鏈脂肪酸變化 如圖4所示，XOS進(jìn)行干預(yù)后，糞便中丁酸含量有上升趨勢（P3X=0.27，P6X=0.41），乙酸含量有下降趨勢（P3X=0.24，P6X=0.26）。
（4）患者糞便腸道菌群變化 腸道菌群的α多樣性變化，如圖5所示，CK組腸道菌群α多樣性未發(fā)生較大改變，而3X和6X組有變化趨勢（Shannon P3X=0.59，Shannon P6X=0.12；Simpson P3X=0.46，Simpson P6X=0.21），即慢性腹瀉患者在XOS干預(yù)之后的腸道菌群多樣性增加，說明XOS有抑制腹瀉患者腸道菌群進(jìn)一步失調(diào)的可能。
腸道菌群變化，如圖6所示，三組患者腸道菌群仍以Firmicutes（厚壁菌門）、Bacteroidetes（擬桿菌門）、Actinobacteriota（放線菌門）以及Proteobacteria（變形菌門）為優(yōu)勢菌門，不同個體間的豐度存在一定差異。經(jīng)過XOS干預(yù)后，3X組和6X組腸道中Firmicutes / Bacteroidetes比例提高，安慰劑干預(yù)后CK組反而下降。通過LEfSe分析得出干預(yù)前后的差異菌屬（圖6B、6C），3X組干預(yù)前的關(guān)鍵物種有Peptostreptococcaceae，6X組干預(yù)前的關(guān)鍵物種為Lachnospira；3X組干預(yù)后的關(guān)鍵物種有Actinobacteriota、Solobacterium、Mogibacterium、Saccharimonadales、Patescibacteria、Saccharimonadia、Abiotrophia 共7種；6X組干預(yù)后的關(guān)鍵物種為Romboutsia。綜上所述，XOS可以上調(diào)Blautia Megamonas、Bifidobacterium、Romboutsia、Lachnospiraceae等菌屬水平，下調(diào)Bacteroides、Prevotella等菌屬水平，推測XOS可以通過調(diào)節(jié)腸道菌群來緩解結(jié)腸炎癥。
（5）糞菌移植小鼠腸道通透性變化 如圖7A所示，與F-CK組相比，F(xiàn)-6X組血清中D-LA水平顯著降低（P<0.01），腸道通透性和損傷程度相比于模型組有所緩解，并且高劑量組干預(yù)效果更好。如圖7B和7C所示，與F-CK組相比，F(xiàn)-3X和F-6X的ZO-1和Occludin含量有所增加，其中F-3X的ZO-1的含量顯著上升（P<0.05），Occludin有增加趨勢（P>0.05）。
（6）糞菌移植小鼠結(jié)腸炎癥因子變化 如圖8所示，相比于灌胃安慰劑干預(yù)后患者糞菌液的小鼠，灌胃XOS干預(yù)后患者糞菌液的小鼠的結(jié)腸IL-10含量顯著性增加（PF-3X<0.01，PF-6X<0.05），Ang1含量從33.37±11.43 pg/mL顯著增加至71.14±22.91 pg/mL、57.03±20.72 pg/mL（PF-3X<0.01，PF-6X=0.1162），TNF-α的含量則顯著下降（PF-3X<0.05），說明接受糞菌移植后的小鼠腸道輕度炎癥得到緩解，其中F-3X組緩解效果更明顯。
試驗總結(jié) XOS在慢性腹瀉的改善中發(fā)揮了較好的效果，具有潛在緩解慢性腹瀉的作用。XOS可以維持腸道屏障趨于穩(wěn)定狀態(tài)，下調(diào)結(jié)腸炎癥水平，人體攝入XOS的量為3 g/d時，對慢性腹瀉的改善效果相對更好。該研究為慢性腹瀉癥狀治療和預(yù)防打開新的思路。
參考資料 王沁玥,仝艷軍,劉登洋,等.低聚木糖對慢性腹瀉癥狀的改善作用[J].食品科學(xué),2022,43(09):167-174.
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