試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選擇40只雄性Wistar大鼠(240-250g)作為研究對(duì)象,將大鼠飼養(yǎng)在環(huán)境控制室(25±2℃)中的不銹鋼絲底籠中,進(jìn)行12h的光照/黑暗循環(huán),然后采用標(biāo)準(zhǔn)半合成飲食喂養(yǎng)大鼠1周。此外,基礎(chǔ)日糧組成為:21%酪蛋白;10%蔗糖;54%玉米淀粉;10%精制花生油;1%NRC維生素合劑;4%伯恩哈特-托馬雷利鹽。待大鼠適應(yīng)環(huán)境一周后,將其分為5個(gè)組(每組8只):對(duì)照組,1,2-二甲基肼(DMH)(陽(yáng)性對(duì)照組),XOS(10%),DMH+XOS(5%)和 DMH+XOS(10%),其中DMH組、DMH+XOS(5%)和 DMH+XOS(10%)的大鼠每周通過(guò)腹股溝區(qū)域的皮下注射接受3劑溶于鹽水(0.5ml)的DMH,DMH在第三次給藥后1周開(kāi)始飲食治療,XOS干預(yù)組飼喂含有XOS的日糧45天,而正常對(duì)照組和DMH對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧。實(shí)驗(yàn)期間大鼠可以自由獲取食物和水,且每隔一周給大鼠稱重以及每天記錄飼料攝入量。在實(shí)驗(yàn)期結(jié)束時(shí),用乙醚麻醉動(dòng)物并通過(guò)斷頭處死,處死后立即切除肝臟和大腸,并用冰冷的鹽水清洗,用于分析盲腸中細(xì)菌、檢測(cè)谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶和過(guò)氧化氫酶的活性以及異常隱窩病灶A(yù)CF的分析。
試驗(yàn)結(jié)果 (1)XOS對(duì)體重、盲腸和肝臟重量的影響 如表1所示,與正常對(duì)照組大鼠相比,DMH對(duì)照組的體重增加和盲腸重量明顯較低(P<0.05),肝臟重量也有所下降。XOS的飲食干預(yù)顯著改善了(P≤0.05)DMH組大鼠的體重和盲腸重量(DMH±5%XOS和DMH±10%XOS),肝臟重量也被日糧中的XOS所逆轉(zhuǎn)。
(2)結(jié)腸內(nèi)容物中的微生物群 如表2所示,與正常對(duì)照組相比,DMH的處理顯著減少了雙歧桿菌的數(shù)量,增加了產(chǎn)氣莢膜梭菌和大腸桿菌的數(shù)量。與正常對(duì)照組和DMH對(duì)照組相比,日糧中添加X(jué)OS導(dǎo)致雙歧桿菌數(shù)量顯著增加(P≤0.05)。與DMH對(duì)照組相比,XOS的補(bǔ)充顯著減少了產(chǎn)氣莢膜梭菌和大腸桿菌的數(shù)量(P≤0.05)。 (3)增殖標(biāo)記:異常隱窩病灶 如圖1所示,與DMH對(duì)照組相比,XOS組的ACF平均大?。ㄒ悦總€(gè)病灶的隱窩數(shù)衡量)顯著降低(P<0.05)。如表3所示,ACF僅存在于用DMH處理的大鼠的結(jié)腸中,但是XOS補(bǔ)充后,對(duì)于1、2、3和4的隱窩/病灶,隱窩多樣性降低了約50%;且在DMH+10%XOS組中,ACF明顯減少,3和4的隱窩未顯示隱窩多樣性。 (4)結(jié)腸粘膜和肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化和抗氧化酶活性的變化 如表4所示,與正常對(duì)照組大鼠相比,DMH處理的大鼠結(jié)腸中的脂質(zhì)過(guò)氧化物減少,補(bǔ)充XOS后其水平明顯恢復(fù)至接近正常水平。此外,DMH處理顯著增加了肝臟中的脂質(zhì)過(guò)氧化物水平,但膳食補(bǔ)充XOS后顯著改善;DMH處理后結(jié)腸粘膜和肝臟中谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)和過(guò)氧化氫酶的活性顯著降低,但補(bǔ)充XOS后二者活性顯著升高。 試驗(yàn)結(jié)論 XOS對(duì)DMH誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸癌模型有保護(hù)作用,XOS的干預(yù)顯著增加了有益菌的數(shù)量,減少了ACF的數(shù)量。此外,飲食中的XOS減少了DMH誘導(dǎo)的結(jié)腸組織抗氧化的改變,這有助于發(fā)揮益生元XOS對(duì)結(jié)腸癌的預(yù)防潛力。
參考資料: Ayyappan A. Aacharya, DuraiswamyGobinatha, Krishnapura Srinivasanb,et al. Protective effect ofxylooligosaccharides from corncobon 1,2-dimethylhydrazine induced colon cancerin rats[J]. Bioactive Carbohydratesand Dietary Fibre, 2015, 5(2):146-152. |