試驗(yàn)設(shè)計(jì) 配制腦心浸液液體培養(yǎng)基和普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基，將變異鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（ATCC25175）置于腦心浸液液體培養(yǎng)基中進(jìn)行復(fù)蘇，在普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行平板劃線，確定變異鏈球菌為純培養(yǎng)；此后采用無菌棉簽刮取平板上適量菌落，與生理鹽水混合制備菌懸液，備用。將普通肉湯液體培養(yǎng)基分裝為5瓶低聚木糖組、5瓶蔗糖組，其中各組低聚木糖和蔗糖質(zhì)量濃度分別為1%、2%、8%、16%、20%，另設(shè)未加入低聚木糖和蔗糖（質(zhì)量濃度為0）的普通肉湯液體培養(yǎng)基為空白對照組；取蔗糖組和低聚木糖組各濃度培養(yǎng)基各200 μL，均加入菌懸液30 μL，混勻后分別注入蜂窩微孔板各孔中，于全自動微生物生長曲線分析儀37℃恒溫條件下培養(yǎng)24 h，每隔30 min檢測吸光度值（A值），計(jì)算培養(yǎng)前后A值的變化量（ΔA），每組測量3次取平均值；取蔗糖組和低聚木糖組各濃度培養(yǎng)基各50 mL，均加入菌懸液50 μL，混勻后于恒溫?fù)u床中培養(yǎng)發(fā)酵（37℃，220 r/min），并在0、5.5、10、24 h取2.5 mL細(xì)菌發(fā)酵液于EP管中，檢測其pH值，計(jì)算細(xì)菌發(fā)酵前后pH值的變化量（ΔpH），每組測量3次取平均值。 試驗(yàn)結(jié)果 （1）低聚木糖和蔗糖對變異鏈球菌生長水平的影響 如圖1所示，變異鏈球菌培養(yǎng)24 h后，各質(zhì)量濃度低聚木糖組與空白對照組細(xì)菌培養(yǎng)基的ΔA比較發(fā)現(xiàn)，質(zhì)量濃度為1%和2%的低聚木糖組與空白對照組細(xì)菌培養(yǎng)基的ΔA比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；質(zhì)量濃度為8%的低聚木糖組細(xì)菌培養(yǎng)基的ΔA大于空白對照組，而質(zhì)量濃度為16%和20%的低聚木糖組細(xì)菌培養(yǎng)基的ΔA明顯小于空白對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 如圖1和圖2所示，變異鏈球菌培養(yǎng)24 h后，質(zhì)量濃度為1%和2%的低聚木糖組與蔗糖組細(xì)菌培養(yǎng)基的ΔA比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；質(zhì)量濃度為8%的低聚木糖組細(xì)菌培養(yǎng)基的ΔA大于蔗糖組，而質(zhì)量濃度為16%和20%的低聚木糖組細(xì)菌培養(yǎng)基的ΔA明顯小于蔗糖組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
（2）低聚木糖和蔗糖對變異鏈球菌產(chǎn)酸水平的影響 如圖3和圖4所示，質(zhì)量濃度為1%、2%的低聚木糖組細(xì)菌培養(yǎng)基ΔpH均高于空白對照組，質(zhì)量濃度為8%、16%、20%的低聚木糖組細(xì)菌培養(yǎng)基ΔpH略低于空白對照組，其差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而各質(zhì)量濃度蔗糖組細(xì)菌培養(yǎng)基的ΔpH均低于空白對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與同質(zhì)量濃度的蔗糖組比較，低聚木糖組細(xì)菌培養(yǎng)基的ΔpH均較高（P<0.05）。該研究結(jié)果顯示，隨著細(xì)菌發(fā)酵時間的延長，低質(zhì)量濃度低聚木糖可能抑制了變異鏈球菌的產(chǎn)酸能力，且各時間點(diǎn)低聚木糖組細(xì)菌培養(yǎng)基的ΔpH均高于相同質(zhì)量濃度的蔗糖組，推測相較于蔗糖，低聚木糖可抑制變異鏈球菌產(chǎn)酸。
試驗(yàn)結(jié)論 低濃度低聚木糖可抑制變異鏈球菌產(chǎn)酸，高濃度低聚木糖可抑制變異鏈球菌生長；相較于蔗糖，高濃度低聚木糖可降低變異鏈球菌的生長及產(chǎn)酸水平，結(jié)合低聚木糖不被腸道吸收、可促進(jìn)腸道益生菌生長、無熱量等優(yōu)點(diǎn)，其可作為齲病易感人群、糖尿病人群、肥胖人群及兒童的食品甜味劑、牙膏甜味劑等。
參考資料： 林丹樂,謝永婷,王雪梅.低聚木糖對變異鏈球菌生長和產(chǎn)酸影響的體外研究[J].中國實(shí)用口腔科雜志,2019,12(08):480-485. |
